Sisällysluettelo:

Kuinka lataat geelielektroforeesia?
Kuinka lataat geelielektroforeesia?

Video: Kuinka lataat geelielektroforeesia?

Video: Kuinka lataat geelielektroforeesia?
Video: (여자)아이들((G)I-DLE) - '퀸카 (Queencard)' Official Music Video 2024, Marraskuu
Anonim

Näytteiden lataaminen ja agaroosigeelin käyttäminen:

  1. Lisätä Ladataan puskurin jokaiselle DNA-näytteellesi.
  2. Kun agaroosi on jähmettynyt, aseta se paikalleen geeli sisään geeli laatikko ( elektroforeesi yksikkö).
  3. Täyttää geeli laatikko, jossa on 1xTAE (tai TBE), kunnes geeli on peitetty.
  4. Huolellisesti ladata molekyylipainotikkaat ensimmäiselle kaistalle geeli .

Tässä suhteessa, kuinka paljon DNA:ta tarvitset geelielektroforeesiin?

Määrä DNA ladata kaivoa kohden on vaihteleva. Pienin määrä DNA joka voidaan havaita etidumbromidilla, on 10 ng. DNA jopa 100 ng:n määrä kuoppaa kohden johtaa terävän, puhtaan juovan muodostumiseen etidiumbromidilla värjäytyneessä geeli.

Lisäksi, miksi geelielektroforeesissa käytetään puskuria veden sijaan? The puskuri tarvitaan pitämään DNA-liuoksen pH lähellä neutraalia, koska se voi muuttua happamaksi elektrolyysin kautta. Elektrodien aiheuttamat sähkövirrat voivat aiheuttaa vettä molekyylejä hajottamaan ja vapauttamaan H+-ioneja.

Ihmiset kysyvät myös, miksi geelielektroforeesissa käytetään merkkiainetta?

Pienemmät palaset liikkuvat nopeammin ja siten pidemmälle kuin suuremmat palaset käärmeessä geeli . Miksi merkkiä käytetään ajettaessa fragmentteja läpi geeli ? A merkki sisältää tunnetun kokoisia DNA-fragmentteja. Merkit ajetaan jokaisessa geeli vertailua varten muiden tuntemattomien fragmenttien kanssa geeli kaistat.

Kuinka paljon DNA:ta voidaan nähdä agaroosigeelissä?

Suurin osa agaroosigeelit tehdään välillä 0,7-2%. 0,7 % geeli tulee osoittavat hyvää erottelua (resoluutiota) suurten DNA fragmentteja (5–10 kb) ja 2 % geeli tulee osoittavat hyvää resoluutiota pienille fragmenteille (0,2–1 kb).

Suositeltava: