Mikä yleensä toimii DNA-kloonausvektorina?
Mikä yleensä toimii DNA-kloonausvektorina?

Video: Mikä yleensä toimii DNA-kloonausvektorina?

Video: Mikä yleensä toimii DNA-kloonausvektorina?
Video: Miksi toimittajat toimivat niin kuin toimivat sekä YLE:llä että muussa mediassa? Mika Aaltola 2024, Marraskuu
Anonim

Niitä on monenlaisia kloonausvektorit , mutta eniten yleisesti käytetyt ovat geneettisesti muunneltuja plasmideja. Kloonaus suoritetaan yleensä ensin käyttämällä Escherichia colia ja kloonausvektorit E. colissa ovat plasmidit, bakteriofagit (kuten faagi λ), kosmidit ja bakteerin keinotekoiset kromosomit (BAC).

Kysyttiin myös, mikä on vektori DNA-kloonauksessa?

Molekyylissä kloonaus , a vektori on DNA molekyyli, jota käytetään vehikkelinä viemään vieraan geneettisen materiaalin keinotekoisesti toiseen soluun, jossa se voidaan replikoida ja/tai ilmentää (esim. plasmidi, kosmidi, lambda-faagit). A vektori sisältäen ulkomaalaista DNA kutsutaan rekombinantiksi DNA.

Tiedä myös, kuinka vektori kloonataan? Kokeellinen menettely

  1. Suorita PCR ja puhdista PCR-tuote: Suorita PCR monistaaksesi insertti-DNA.
  2. Pilko DNA:si:
  3. Eristä inserttisi ja vektorisi geelipuhdistuksella:
  4. Liitä inserttisi vektoriin:
  5. Muunnos:
  6. Eristä valmis plasmidi:
  7. Tarkista plasmidi sekvensoimalla:

Kuinka pBR322 toimii tässä suhteessa kloonausvektorina?

pBR322 Plasmidi pBR322 oli yksi ensimmäisistä plasmideista, joita käytettiin tähän tarkoitukseen kloonaus . Se sisältää geenejä, jotka vastustavat tetrasykliiniä ja ampisilliinia. DNA:n insertio spesifisiin restriktiokohtiin voi inaktivoivat tetrasykliinin geenin (vaikutus tunnetaan insertionaalisena inaktivoitumisena) tai ampisilliiniresistenssiä.

Millä tekniikalla voidaan tehdä useita kopioita tietystä DNA:n osasta hyvin nopeasti?

Polymeraasiketjureaktio

Suositeltava: